说明：本文内容均来源于以下论文
《Phagocytosis via Complement or Fc-Gamma Receptors Is Compromised in Monocytes from Type 2 Diabetes Patients with Chronic Hyperglycemia》
作者：Blanca I. Restrepo, Marcel Twahirwa, Mohammad H. Rahbar, Larry S. Schlesinger
发表于：《PLOS ONE》2014 年 3 月 | 第 9 卷 | 第 3 期 | e9297
Ø Savillex相关PFA实验器皿：
            
      Savillex PFA Jar              PFA Closure                PFA Well
Ÿ Savillex PFA制品优势：极低吸附性及化学惰性利于3D细胞培养，可干热灭菌。
Ø 论文摘要（翻译）：
2型糖尿病（DM2）患者罹患结核病（TB）的风险显著升高，这可能与单核吞噬细胞功能缺陷有关，而此类细胞在控制结核分枝杆菌感染中起关键作用。我们前期研究发现，DM2患者的单核细胞对血清调理的结核分枝杆菌结合能力降低。为明确这一现象是否源于补体或Fcγ受体（FcγRs）介导的吞噬功能缺陷，本研究比较了DM2与非DM2受试者单核细胞对IgG或补体包被绵羊红细胞的摄取能力。
通过单变量及多变量分析发现：
· 慢性高血糖与两种受体介导的吞噬功能下降显著相关；
· 该缺陷与宿主血清调理素无关；
· 流式细胞术证实DM2单核细胞的吞噬受体表达水平未降低。
两种吞噬途径呈显著正相关（R=0.64，p=0.003），表明慢性高血糖个体的单核细胞存在双重吞噬途径功能障碍。
鉴于吞噬作用与细菌杀灭效应机制的激活密切相关，这一缺陷可能是DM2患者对结核分枝杆菌等病原体易感性增高的关键因素之一。
Ø 材料与方法（翻译节选）：
单核细胞分离、培养与保存方案
采用Ficoll-泛影钠密度梯度离心法（(GE Health, Piscataway, NJ）从肝素抗凝全血中分离外周血单个核细胞（PBMCs）。对于流式细胞术分析，将PBMCs分装冻存于含10% DMSO和20%胎牛血清的RPMI培养基中，保存温度为-70℃。
对于功能学研究，剩余新鲜PBMCs接种于聚四氟乙烯培养罐（Savillex Corp., Minnesota, monocyte）中，使用含20%自体血浆的培养基（细胞密度1.5-2.0×10⁶/ml）进行培养[1]。经过16-18小时孵育后，PBMCs经洗涤重悬于含2% HEPES和20%自体血浆的RPMI培养基中，随后以2×10⁶细胞/孔的密度转移至8孔玻璃腔室载玻片（Thermo Scientific, West Palm Beach, FL）。在37℃、5% CO₂条件下孵育2小时后，移除未贴壁细胞。经吉姆萨染色确认，剩余贴壁细胞中单核细胞纯度≥90%。随后对这些细胞进行Fcγ受体和补体受体介导的吞噬功能评估。
【1】Schlesinger LS, Bellinger-Kawahara CG, Payne NR, Horwitz MA (1990) Phagocytosis of Mycobacterium tuberculosis is mediated by human monocyte complement receptors and complement component C3. J Immunol 144: 2771–2780
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